|
大鼠白介素6ELISA試劑盒[大鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒,大鼠IL-6 ELISA試劑盒]
|
產品介紹Product Description
規格:96T/48T
分類:生化檢測
儲存條件:2~8℃
用途:ELISA檢測
注意事項:定量/定性
產品名稱:大鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒
品牌:金益柏
種屬:大鼠ELISA試劑盒
保存及有效期:2~8℃,六個月;-20℃,一年
產品用途:科研實驗
檢測方法:酶聯免疫法/酶免法(ELISA)
檢測目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿,細胞上清液及相關液體樣本中白介素6(IL-6)的含量。
ELISA試劑盒標本:血清,血漿,尿液,細胞培養上清,體液,心房水,組織標本等
產品優勢
1.產品種類齊全、質量可靠、價格優惠、靈敏度高、效果穩定、易保存、操作簡便
2.免費提供產品最新報價、實驗原理、產品用途及說明書
3.發貨及時(南京本地客戶有專門人員送貨上門及取標本)
4.免費提供ELISA待測服務,金益柏擁有自己的實驗室和技術團隊
5.公司提供全方位的售前,售中,售后技術支持服務,為您解決實驗過程中遇到的問題。
一、實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠白介素6(IL-6)水平。用純化的大鼠白介素6(IL-6)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白介素6(IL-6),再與HRP標記的白介素6(IL-6)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素6(IL-6)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠白介素6(IL-6)含量。
二、大鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒組成:
試劑盒組成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
說明書 |
1份 |
1份 |
|
封板膜 |
2片(48) |
2片(96) |
|
密封袋 |
1個 |
1個 |
|
酶標包被板 |
1×48 |
1×96 |
2-8℃保存 |
標準品:9ng/L |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
標準品稀釋液 |
1.5ml×1瓶 |
1.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
酶標試劑 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
樣品稀釋液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
顯色劑A液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
顯色劑B液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
終止液 |
3ml×1瓶 |
6ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
濃縮洗滌液 |
(20ml×20倍)×1瓶 |
(20ml×30倍)×1瓶 |
2-8℃保存 |
三、自備材料
1)蒸餾水。
2)加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3)振蕩器及磁力攪拌器等。
四、大鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
五、樣本信息問題解答
我能否使用自己的稀釋液或者緩沖液?
答:每個試劑盒中都含有按配方配制的與特異性樣品種屬相配套的稀釋液,以確保待檢測的樣品被正確稀釋。具體請參看說明書。
建議:
① 確定待檢測的樣品在收集和制備時保證無菌操作;
② 如果要檢測多個樣品,將樣品隔離并標記清楚以防相互污染;
③ 檢測前,將樣品離心除去顆粒。將樣品轉至新的離心管內,混合均勻;
④ 在混合樣品時,使用容積至少比樣品體積大50%的離心管以保證混合充分。
我沒有足量的稀釋液去稀釋所有的樣品,怎么辦?
答:①試劑盒內提供說明書中所指定的足量的稀釋液。能保證所有的標準品和樣品檢測兩次;
②如果沒有推薦的稀釋度,或者需要大量稀釋,請在實驗前計算出所需的稀釋液總量,然后聯系技術服務部門獲取額外的稀釋液。
我能否使用試劑盒內非推薦的樣品類型?
答:試劑盒內說明書中所指定的樣品類型是經過驗證可行的,其他推薦的樣品類型是沒有經過任何檢測的。
六、大鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒操作步驟
七、注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
|
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
(此圖僅供參考)
九、大鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒性能
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.95以上。
2.批內與批間應分別小于9%和11%